Определение группы крови стандартными сыворотками

Содержание

Методы определения группы крови

Определение группы крови стандартными сыворотками

В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность.

Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции.

Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур.

Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.

Состав крови различных групп крови

Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».

Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.

Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.

Выделяются следующие группы крови по составу:

  • I (0) – ά, β — поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
  • II (А) – β — на поверхности имеется антиген А и антитело β;
  • III (В) – ά — поверхность содержит В с антителом типа ά;
  • IV (АВ) – 00 — поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.

Определение групп крови

Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система — посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.

Разведение производится так:

  1. В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.
  2. Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.

Непосредственно исследование проводится таким образом:

  1. На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
  2. Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

Правила расшифровки результатов

Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.

: Определение группы крови и резус-фактора

Здесь возможны варианты:

  • Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы;
  • Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй;
  • При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III;
  • Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.

Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.

На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками   Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами  Группы крови
0(I)A(II)B(III)AB(IV)0(I)A(II)B(III)
++0(I)
+++A(II)
+++B(III)
+++AB(IV)

+ агглютинация;

– агглютинация отсутствует;

— реакцию не проводят.

Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.

Определение группы крови цоликлонами

Цоликлоны — синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.

Цоликлоны

Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.

 Вид цоликлонов Группа крови
Результат агглютинацииАнти-ААнти-В
0(I)
+A(II)
+B(III)
++AB(IV)

IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:

  • Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0;
  • Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования;
  • Стеклянные палочки для перемешивания образцов;
  • Чистая пипетка для набора растворов.

Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.

Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.

В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

: Определения групп крови с помощью цоликлонов

Источник: https://moyakrov.info/blood/opredelenie-gruppy-krovi

Определение группы крови стандартными сыворотками – подробная информация

Определение группы крови стандартными сыворотками

В наше время медицина достигла больших высот. Врачи способны проводить долгие операции и спасать людей даже из самых, казалось бы, безвыходных в плане выживания ситуаций.

Однако, в таких случаях приходится сталкиваться с проблемой необходимости переливания крови. Долгое время это было мало осуществимо в связи с тем, что пациенты умирали очень быстро.

Но данный вопрос был решен открытием понятия групп крови, а точнее обнаружения на эритроцитах антигенов и, в свою очередь, антител в плазме крови.

Определение группы крови стандартными сыворотками

Что есть группа крови

В начале двадцатого века Австралийский врач, по совместительству ученый К. Ландштейнер открыл наличие в крови антигенов и антител. Антигены находятся на поверхности эритроцитов. Их бывает 2 вида.

Для простоты биологи обозначили их как A и B. В свою очередь антитела содержатся в плазме крови и получили названия α и β. Если A соединить с α, а B с β, начнется процесс сворачивания крови.

Данная реакция носит название гемагглютинация.

Таким образом из имеющихся наборов антигенов и антител можно составить 4 типа крови, приведенных в таблице ниже:

Номер группыМировое обозначениеАнтигеныАнтитела
I0Отсутствуютα и β
IIAAβ
IIIBBα
IVABA и BОтсутствуют

Группы крови и характер

Важно! В зависимости от того, какой тип донорской крови предоставляется для переливания, кровь пациента либо сворачивается, либо нет. Первый случай грозит летальным исходом.

Сыворотки для проведения реакции

На текущий момент имеется достаточно большое количество способов определения группы крови. Но большая часть из них рассчитана на анализ в крупных лабораториях. Однако, даже если вы находитесь в маленькой деревушке или в месте, где никак не получится обратиться в подобные учреждения, возможность выявления номера группы крови все равно остается.

Определение группы крови осуществляется с применением четырех специальных стандартных сывороток, которые будут изготавливаться из крови человека. Они выпускаются либо во флакончиках, либо в ампулах по 2-5 мл и соответствуют разным группам крови:

  1. 0. Выпускается с белой этикеткой и имеет прозрачный цвет.
  2. A. Жидкость голубой окраски. На флакон наносятся две синие полосы.
  3. B. Жидкость бледно-розового оттенка. На флаконе присутствуют три полосы той же окраски.
  4. AB. Жидкость желтого окраса. На флакон нанесены 4 полосы того же цвета.

Сыворотки для проведения реакции на группу крови

Важно! На самом деле указанные реагенты при изготовлении не имеют цвета. Они окрашиваются специально, чтобы при использовании их было невозможно перепутать.

Также на этикетки наносятся:

  • титр;
  • дата производства;
  • срок годности;
  • данные об изготовителе;
  • серийный номер.

Как определяется группа крови

Чтобы определить группу крови, понадобится:

  • плоская тарелка с 8 углублениями;
  • стеклянные палочки или пипетки — 8 штук;
  • 2 набора сывороток разной серии для исключения возможности ошибок;
  • обычные или песочные часы.

Инструменты для определения крови стандартными сыворотками

На плоскую тарелку помещаются сыворотки в 2 ряда, после чего берутся стеклянные палочки. С их помощью в ряды вносится исследуемая кровь.

Этими палочками она размешивается, после чего тарелку начинают покачивать.

Если повезет, процесс можно отследить за 10-30 секунд, но лучше это делать до 5 минут, чтобы исключить возможность заторможенности реакции. Затем происходит изучение и расшифровка полученных результатов.

Внимание! В первую очередь следует обратить внимание на кружки, в которые была налита сыворотка II и III групп крови. Интерес представляет наличие мелких хлопьев, появляющихся в результате агглютинации — слипания эритроцитов.

  1. Если ни во II, ни III хлопьев нет, а также при дополнительной проверке ни в I, ни IV также ничего не свернулось, значит имеется первая группа крови.
  2. Если в результате свертывание отмечается везде, кроме сыворотки II группы, значит исследуемая кровь относится ко второй группе.
  3. Если свертывание наблюдается во всех образцах, кроме сыворотки III группы, значит исследуемая кровь относится к одноименной группе.
  4. Если сворачивание прошло во всех образцах, кроме сыворотки IV группы, значит анализу была подвержена одноименная группа крови.

Проведение определения группы крови

Важно!Строго говоря, группу крови можно определить, имея сыворотки только 2 и 3 группы крови. Однако, как можно сделать вывод из сути метода, имеется большое влияние человеческого фактора. По этой причине сыворотки I и IV группы крови используются в качестве дополнительной проверки.

После процедуры используемая посуда должна быть хорошо промыта теплой водой и высушена. Затем ее можно использовать для дальнейших исследований.

Неточности результатов и их причины

Иногда бывает так, что сгустки слипшихся эритроцитов видны не очень четко. Во время проверки зачастую может быть добавлен изотонический раствор хлорида натрия. Он позволяет исключить вероятность ложной агглютинации, заставляя рассыпаться обратно хлопья, получившиеся не в результате процесса свертывания.

Важно! Если результат анализа виден не особо четко, его необходимо переделать и воспользоваться микроскопом, чтобы рассмотреть мелкую агглютинацию.

В случае четко выявленного результата можно сразу точно назвать пациенту его группу крови. Иначе следует обратиться к другим методам проведения анализа.

Не стоит забывать и о возможности ошибок, которые обычно происходят по следующим причинам:

  • использование просроченной или слабой сыворотки;
  • использование слишком большого количества исследуемой крови по отношению к объему сыворотки;
  • реакция проводится намного дольше, чем положено нормативами;
  • температура окружающей среды не соответствует нормальной, в результате чего происходит холодовая агглютинация эритроцитов.

Наиболее частые причины ошибок при определении групп крови

Дополнительно стоит заметить, что в процессе высыхания по краям смеси сыворотки и исследуемой крови возможно образование зернистых участков, которые не могут служить показателями реакции.

Использование результата на практике

Как уже упоминалось, определение группы крови проводится для исключения летального исхода во время ее переливания. В идеале пациенту, принимающему кровь — реципиенту — необходимо переливать кровь той же группы, что и у него самого.

Однако так получается далеко не всегда. Хотя бы потому, что людей с первой группой крови подавляющее количество — 50%.

В то же время они являются универсальными донорами, поскольку у них отсутствуют агглютиногены, которые стимулируют процесс свертывания крови.

Внимание! Что касается пациентов с IV группой крови, то их можно назвать универсальными реципиентами, поскольку их организм способен принять кровь любой группы. В то же время их кровь не может быть перелита представителям другой группы.

Для наглядности совместимости доноров и реципиентов приведем таблицу:

Номер группыДля каких групп становится доноромДля каких групп становится реципиентом
II, II, III, IVI
IIII, IVI, II
IIIIII, IVI, III
IVIVI, II, III, IV

Совместимость групп крови

В современном мире знание группы крови жизненно необходимо. От этого, с точки зрения врачей, будет зависеть коэффициент выживаемости из пациентов.

С точки зрения обычных людей это шанс в экстренной ситуации сохранить свою жизнь.

В связи с этим не лишним будет знать свою группу крови и, по возможности, проставлять ее в паспорт либо другие документы, поскольку риск здоровью и жизни может возникнуть в любой момент.

— Определение группы крови и резус-фактора

Источник: https://med-explorer.ru/serdechno-sosudistaya-sistema/simptomatika-i-diagnostika-serdechno-sosudistaya-sistema/opredelenie-gruppy-krovi-standartnymi-syvorotkami.html

Определение группы крови по стандартным сывороткам: с помощью, резус-фактора, методом

Определение группы крови стандартными сыворотками

Система АВО — наиболее распространенная в мире классификация человеческой крови. Основа разделения крови на 4 группы — принцип взаимодействия антигенов и антител.

В эритроцитах (красных тельцах) человеческой биологической жидкости может находиться 2 агглютиногена — А и В, а в плазме 2 вида агглютинина — Анти-А и Анти-В. Их сочетание является тем признаком, по которому определяют группу — 0, А, В или АВ, соответственно, 1, 2, 3 или 4.

Определение групп крови по стандартным сывороткам, содержащим антигены, — это простая и быстрая реакция.

Суть метода

Определяют группу с помощью изогемагглютинирующих средств — лабораторных реагентов. Исследование проводится, когда смешивают реагент с нативной кровью, и при добавлении раствора натрия хлорида (0,9%).

В процессе исследования изучается, какие антитела (антигены) имеются у натива, а какие отсутствуют. Таким образом и определяется, какая кровь — 0, А, В или АВ.

В каждой группе свой набор агглютиногенов (антигенов) и агглютининов (антител):

  • 1 (или нулевая) — на поверхности красных кровяных телец присутствует антитело A и антитело B. При этом полностью отсутствуют антитела в сыворотке. Поэтому реакции агглютинации не происходит.
  • 2 — есть в крови агглютинин B (антитело), агглютиноген (антиген) А.
  • 3 — наличествует антиген В и антитело A.
  • 4 — присутствуют оба белка (2 антитела), и нет ни одного антигена. Она является наименее распространенной — около 8% населения.

Определение группы крови по стандартным сывороткам необходимо для того, чтобы при переливании агглютинация ни привела к летальному исходу того, кто подвергся гемотрансфузии. Реакция агглютинации, т. е. склеивания, происходит тогда, когда при попадании сыворотки на эритроциты натива начинается процесс уничтожения этих телец.

Склеиваться клетки будут при взаимодействии антигена А и антитела A. И при взаимодействии антигена В и антитела B. При агглютинизации в пробе всегда появляются хлопья — склеенные между собой красные клетки.

Изготовление сыворотки

Сыворотки для определения группы крови производят в лабораторных условиях из плазмы человека-донора. Занимаются изготовлением этих реагентов в пунктах переливания.

Пробы хранятся и перевозятся в герметических колбах при определенной температуре. В сыворотке для определения группы содержатся α- и β-гемагглютинины.

На колбе указано, каковы концентрация этих белков, срок и температура хранения.

Проведение исследования

Исследование проводят 2 раза. Сначала простым способом, сразу после забора, затем методом перекрестной реакции в дезинфицированной лаборатории. Есть несколько условий проведения реакции.

Узнать группу крови с помощью стандартных сывороток возможно при условии, что срок их годности не истек, а титр (концентрация) реагента будет 1:32 и выше.

Важно соблюдение температуры в помещении +15…+25ºС .

Ход анализа таков:

  1. На тарелке и пластиковом планшете подписывают номера групп возле углублений.
  2. Пробы каждой сыворотки помещают в отведенные углубления в планшете (по 1 или 2 капли).
  3. Пипеткой отмеряют по капле крови самого пациента, располагают их рядом с сыворотками и несколько раз размешивают.
  4. В каждую пробу капают изотонический раствор натрия хлорида.
  5. Дополнительно используют сыворотку АВ.

По истечении 5 минут видны результаты. Для точности выполняют анализ с реагентами 2 разных серий выпуска. Бывает, что реакция агглютинизации плохая, тогда ее наблюдают через микроскоп.

Обязательно во время проверки исследуют и то, какой резус-фактор — положительный или отрицательный. Резус — это белок, который у большого процента населения присутствует на поверхности эритроцитов. Если он есть, резус положительный. Если белок отсутствует, это фиксируется. Резус-фактор определяется с помощью плазмы и особой анти-Д-сыворотки.

Проверяется наличие резуса таким же образом, как и при определении разряда системы АВО — наблюдая за реакцией склеивания.

Результаты проверки

Первое исследование дает результаты через 3-5 минут. Простой метод со стандартными сыворотками дает 4 возможных варианта:

  1. В обеих пробах с сыворотками 2 и 3 групп агглютинации нет. Результат свидетельствует о том, что нативная кровь относится к первому разряду.
  2. Свертывание во всех пробах, кроме той, что под номером 2. Вторая группа.
  3. Обнаруживается агглютинация в пробе №3, в остальных — нет. Группа соответствует 3.
  4. Свертываемость во всех, включая сыворотку АВ. Группа 4.

Определение группы крови стандартными сыворотками возможно в любом медицинском учреждении, т. к. эту процедуру способна провести сразу после забора крови процедурная медсестра.

Метод перекрестной реакции и метод цоликлонов

Методом простой реакции группу устанавливают с помощью лабораторной сыворотки. Второй способ — метод перекрестных реакций — делается лаборантом. Для его проведения используют стандартные эритроциты и плазму самого пациента. Ее добывают, когда в процессе центрифугирования тяжелые клетки отделяются от плазмы.

Для проверки понадобится 2 капли сыворотки после центрифугирования и отстоя не менее чем 1, 5 часа. В лабораторную планшетку опускают 2 капли добытого биологического материала и добавляют каплю со стандартными красными кровяными тельцами. В первую каплю плазмы помещают кровяные тельца с агглютиногенами 2 группы, а во вторую пробу — с антигенами третьей.

Метод перекрестной реакции считается контрольным и более достоверным. Реакция с эритроцитами оценивается следующим образом:

  • Агглютинация есть и в 1, и во 2 капле. Это кровь обозначается как 0 или 1.
  • Реакции нет в обеих случаях — это 4.
  • Реакция склеивания там, где добавляли эритроциты второй категории — это 2. И, соответственно, 3 группа, где контрольные эритроциты третьего варианта.

Метод цоликлонов

Группу системы АВО также можно установить и с помощью цоликлонов. Эти реагенты сделаны при помощи достижений генной инженерии из крови лабораторных мышей. Тут используют моноклональные антитела, продуцируемые только из одной антителообразующей клетки.

Источник: https://MedicalOk.ru/gruppa-krovi/opredelenie-po-standartnym-syvorotkam.html

Как определяют группу крови стандартными сыворотками, методы и особенности проведения

Определение группы крови стандартными сыворотками

Во многих случаях скорую медицинскую помощь пострадавшему человеку возможно оказать только при знании принадлежности его крови по классификации АВ0. Ведь бывают ситуации, когда кровотечение невозможно остановить оперативно, и переливание – это необходимая манипуляция для реанимации пациента. В экстренных случаях невозможно узнать группу и резус.

Знание своих характеристик может ускорить оказание медицинской помощи

Так же важно проводить подобные исследования при планировании и во время вынашивания ребенка для определения трансфузионной совместимости и для выявления риска проявления гемолитической болезни у новорожденного, причиной которой становится несовместимость крови матери и плода по системе AB0. Возможные различия могут привести к иммунным конфликтам в организме матери. Поэтому стоит как можно раньше узнать о наличии или отсутствии теоретически возможного заболевания.

Для этого существуют моментальные тесты, позволяющие определить тип крови.

Определение типа крови при беременности – один из важных этапов диагностики

Суть метода на основе сыворотки

Сывороточный метод хорош в тех случаях, когда из-за дополнительных сложностей с определением группы крови (например, иммуно-дефицитный, возрастной фактор) требуется довольно широкий спектр тестов. Сыворотка же способна свести множество измерений к одному.

Под группой в гематологии подразумевается набор антигенов, которые, располагаясь на эритроцитах, определяют их особенности.

Антигены представляют собой огромный ряд веществ с разными свойствами и качественными характеристиками, но классифицируют по двум системам:

  • Система AB0. Представляет собой два эритроцитных антигена, объединённых в группы – агглютиногены A и B, плюс два соответствующим им антитела – a (анти-А) и b (анти-B). Их совокупность или же сочетание друг с другом и образует разнообразие известных сегодня групп крови (всего их 4). Отдельно выделяется ряд разновидностей сильных или слабых вариантов одних и тех же антигенов. Например, антиген A1, имеющий концентрацию более 80% или A2, составляющий 20% и так далее. Знание такой теоретической специфики предназначено для предотвращения ошибки в результатах исследования, которая может привести к летальному исходу, так как схема реанимационного лечения будет полностью нарушена, и возможность найти нового донора с соответствующей группой крови не всегда есть.

Строго необходимо переливать кровь, эритроциты и плазму того типа, который отмечен у реципиента, чтобы при переливании не произошла реакция отторжения. В ситуациях особенной экстренности возможно переливание эритроцитов группы 0, у которых отсутствуют групповые агллютиногены.

Таблица по системе АВ0

  • Система резус-фактора. Резус-фактор – это еще один антиген, который обозначается латинской буквой D. Он либо присутствует на эритроцитах (любой группы по АВ0), либо нет. В последнем случае человек считается резус-отрицательным. Есть и другие резус-антигены, но они гораздо менее иммуногенны, не вызывают реакции отторжения и поэтому не учитываются.

Определение резус- фактора

Стандартные сыворотки для определения группы крови – это специальные растворы, полученные путем извлечения из донорской крови плазмы с входящими в неё антителами и разведенные добавлением в этот состав изотонического раствора хлорида натрия.

Методика определения показателей

Алгоритм, который обуславливает определение группы крови и резус-фактора стандартными сыворотками, сводится к ряду манипуляций.

Результаты исследования

При положительном результате в течение нескольких первых минут, ещё до добавления изотонического раствора, происходит склеивание эритроцитов, которое проявляется в возникновении красных сгустков в реагирующем растворе.

В дальнейшем эти зернышки могут, сливаясь друг с другом, образовывать красные «островки». Если же говорить научным языком, это гемагглютинация – процесс склеивания между собой с дальнейшим выпадением в осадок эритроцитов крови.

Если же после проведённых манипуляций розовый цвет раствора остался неизменным, то реакция, что логично, является отрицательной.

Существует ряд закономерностей, которые зависят от комбинаций положительных и отрицательных реакций в сыворотках:

  • В случае если положительной реакции нет ни в одном из исследуемых секторов, то это означает, что реципиент имеет кровь группы 0(I).
  • Если неизменной осталось состояние сыворотки А(I), а две остальные дали положительную реакцию, это значит, что кровь исследуемого имеет А(II) группу.
  • В случае отрицательной реакции только на В(III) из всех трёх говорят, что реципиент имеет ту группу крови, на которую не «пошла», то есть В(III).
  • Если же красные зернышки образовались в каждой из трёх жидкостей, то такая кровь относится к AB(IV) группе.

Для удобства запоминания используется либо схема, либо таблица. Возникновение иных комбинаций относят к ошибочным, получившимся из-за погрешностей при проведении исследования.

Результаты исследования

Существует ряд таких погрешностей:

  • Неверная концентрация крови, используемой для измерения. Обычно к ложным результатам приводит превышение заданной нормы для добавления к сыворотке.
  • Несвежесть взятых образцов сыворотки или их неправильное хранение приводит к малоактивным реакциям с эритроцитами.
  • Низкие температуры могут привести к панагглютинации, которая, как правило, тоже проходит очень слабо.
  • Неточность временных рамок может привести к подсыханию поверхности сыворотки. То есть результат исследования становится почти не заметен.

Метод проведения исследования на предмет группы крови с использованием стандартных сывороток – самый распространённый среди мгновенных исследований в условиях экстренной необходимости. Это делает его наиболее значимым и уникальным в условиях современной медицины.

Несколько стандартных способов определения группы и резуса крови, используемых в частных и муниципальных лабораториях:

Источник: http://LechiSerdce.ru/analiz-krovi/11094-opredelyayut-gruppu-krovi-standartnyimi-syivorotkami.html

Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ

Определение группы крови стандартными сыворотками

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлон анти-А;

цоликлон анти-В;

цоликлон анти-D;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

 Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

AB (IV)Rh-

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки
  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин.

При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV).

Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.

  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.

  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными.

Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при  реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают.

Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Источник: http://anest-rean.ru/gruppa-krovi/opredelenie/

Параметры определения группы крови

Определение группы крови стандартными сыворотками
: 4 876

Кровь обладает особыми иммуногенетическими свойствами, по которым всех людей можно разделить на определенные группы. Каждый человек обязан знать, к какой группе крови он принадлежит.

Это может понадобиться при оказании экстренной медицинской помощи, когда невозможно по какой-либо причине провести достоверное определение группы крови. Исследователями была подтверждена связь между группами крови и заболеваниям.

Определив свою группу крови, человек сможет узнать особенности своего здоровья и вовремя профилактировать болезни.

Групповую систему AB0 открыл миру Ландштейнер еще в 1900 году. Позже изучались другие различия крови человека и животных (например, резус-фактор).

Принадлежность к группе крови закреплена в генетическом коде, и наследуется с другими индивидуальными признаками. Формирование антигенного состава крови происходит во внутриутробном периоде, и он не изменяет свои специфические свойства всю жизнь человека.

Элементы кровяной системы

В жидкой подвижной плазме крови равномерно распределены клеточные элементы: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты. Форменные элементы занимают до 35-45% от общего объема крови.

Помимо этого в плазме находятся жировые частицы клеток, так называемая «кровяная пыль» (гемоконии). Эритроциты в крови могут содержать в своем составе специфические антигены (агглютиногены A и B). В плазме крови могут обнаруживаться антитела (агглютинины α и β).

Комбинации антигенов и антител позволяют классифицировать группы крови по системе AB0.

Варианты комбинации реакции агглютинации

Иные виды групповых систем крови избирают только присутствие антигенов в эритроцитах. Антитела к ним обычно появляются при вливании реципиенту неподходящей крови, иммунологической несовместимости группы крови беременной женщины и плода.

Согласно системе AB0 всех людей разделяют на такие группы:

  • Первая 0 (I) (1 группа крови) – в красных кровяных тельцах нет антигенов, а в сыворотке обнаруживаются агглютинины α и β
  • Вторая A (II) – содержит в своем составе агглютиноген A
  • Третья B (III) (3 группа крови) – присутствует агглютиноген B
  • Четвертая AB (IV) – вместе фиксируются эритроцитарные агглютиногены A и B.

Система AB0 дает возможность избежать опасных последствий при неправильном переливании крови. Для идеальной совместимости крови нужно, чтобы кровь донора соответствовала такой же группе в системе AB0, что и кровь пациента.

Переливание чужеродной группы крови может вызвать иммунологическую несовместимость и приведет к трансфузионным осложнениям.

Перед процедурой переливания крови обязательно изучают состав крови и проводят ряд анализов на совместимость.

Лабораторные компоненты

Для определения типа группы крови пациенту не требуется специальной подготовки, необходимо лишь воздержаться от употребления алкоголя и не принимать никаких лекарственных средств накануне анализа.

В лабораторию берут с собой направление от врача. Хорошо заранее приобрести одноразовый набор для взятия крови или шприц – это надежно защитит от возможного инфицирования в процессе отбора проб.  Забор крови делают из пальца или вены. У грудного ребенка кровь обычно берут из пятки.

В основе определения типа крови лежит реакция агглютинации, при этом образуются хлопья склеенных между собой эритроцитов. Набор для лабораторного исследования на группу крови включает стандартные сыворотки и эритроциты в виде раствора, контрольные реактивы, физиологический раствор (натрия хлорид 0,9 %-ный) и специальные белые пластинки из пластика или фарфора, пипетки.

Набор для лабораторного исследования крови

Для достоверного результата анализа крови, в лаборатории должна быть температура воздуха в пределах 21-24° C и яркое освещение. Все расходные компоненты обязательно проверяют на соответствие единой серии, срокам использования и условиям хранения. Недопустимо наличие взвеси, осадка, помутнения в растворах эритроцитов и сыворотке.

Определение сыворотками

На белой пластинке отмечают по порядку названия групп крови 0, A, B. Большие капли стандартной сыворотки групп 0(I), A(II), B(III) наносят на пластину напротив ее надписи, а рядом сыворотки другой серии: получается два ряда капель.

Использование разных серий реагентов применяют для исключения ошибки. Каждую каплю стандартной сыворотки аккуратно смешивают с небольшой каплей крови пациента.

Все манипуляции выполняют пипеткой или палочкой из стекла. Затем пластину немного покачивают и оценивают результат исследования в каждой капле.

Если в течении пяти минут образуются хлопья из агглютинированных эритроцитов, результат принимают за положительный.

Для исключения возможной ошибки, каждую каплю крови на пластине смешивают с каплей физраствора и ожидают еще пять минут. Если хлопья начинают оседать во всех каплях, то проводят контроль реакции, путем смешивания исследуемой крови и стандартного раствора сыворотки группы AB(IV). В последнем случае склеивания эритроцитов не должно регистрироваться.

Пластина с сывороткой крови

Определение группы крови на основании полученных результатов:

  • Первая группа – ни в одной из капель не произошло склеивание эритроцитов
  • Вторая (2) группа крови – положительная реакция крови с сыворотками групп 0(I) и B(III)
  • Третья группа – агглютинация крови со стандартными сыворотками 0(I) и A(II)
  • Четвертая (4) группа крови – положительный результат в трех каплях и отрицательный с контрольной сывороткой AB(IV).

Существует перекрестный способ определения типа плазмы, при этом дополнительно используют стандартные эритроциты.

Этот способ определения группы крови помогает выявить плазменные групповые антител α и β и открывает более полную характеристику крови. Применяют перекрестный способ перед переливанием крови.

Отбор проб венозной крови проводят заранее, ее отстаивают и отделяют плазму от форменных элементов.

Иногда вместо стандартных сывороток, применяют растворы Цоликлон с моноклональными антителами. Получают их при участии технологий генной инженерии.

При определении группы крови цоликлонами, очень важен квалификационный уровень медицинского работника, его аккуратность и внимательность. Ошибочный результат могут спровоцировать неправильный порядок нанесения реактивов, использование загрязненных или мокрых пипеток, непригодных реагентов, пренебрежение контрольным исследованием.

Редкость результатов

При анализе медицинских статистических данных оказывается, что наиболее распространена первая группа крови – до 65% всего населения Земли. За ней следуют вторая с результатом 25% и третья (около 8% населения). Самым редким результатом при определении групп крови остается четвертая группа, особенно с отрицательным резус-фактором.

Результаты определения группы крови регистрируются медицинским сотрудником, проводившим анализ, в амбулаторной карте или документе, удостоверяющем личность (паспорт). Обязательно вносится дата исследования и подпись ответственного медицинского работника.

Источник: https://SostavKrovi.ru/gruppy/parametry-opredeleniya-gruppy-krovi.html

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.